技術 | 還在 2D 細胞培養？Out 了，3D 培 養玩起來！ 
                                                               作者：燕子 
你的細胞是養在哪兒呀？......不就是塑料的細胞培養皿中嗎？圓的，方的，長的隨你選俺都 有！ 
 
那你的組織實驗和細胞實驗結果都能一致嗎？嗯嗯，大部分還是能的，那另一部分呢？我也 不知道嘞！做了好多遍的！

其實呢，我們在細胞水平的研究大部分呢還是在 2D 水平的，然而細胞在體內生活的環境遠 遠復雜的多。3D 細胞培養相比 2D,優勢就很明顯，更接近細胞的體內狀態，能夠提高細胞因 子、抗體和其他分子的產量，測試劑盒已經到了 ρg 級細胞因子測不到心酸再也不會有了！ 在 3D 體系內干細胞能夠有效的分化，基因表達、細胞活動與體內過程更接近。 

 建立 3D 細胞體系，聽上去很復雜的樣子；現在就用模擬肺環境為例，介紹一下肺部 3D 體 系建立。 
 Immunocompetent 3D Model of Human Upper Airway for Disease Modeling and In Vitro 
Drug Evaluation 
 建立上皮細胞&纖維原細胞共培養體系 
 ES 支架切割成 2cm2 每小塊，放置距離紫外光源 8cm 處滅菌 15min,每一面都需要這樣操作
滅菌哦。切割好的支架移入 12 孔板中（無菌操作），將一個鋼圈放置在支架上,加抗生素再 進一步滅菌，放入恒溫孵箱過夜。吸去抗生素，用 PBS 清洗，后加細胞培養液浸沒支架。在 支架支撐物里上皮細胞支架放在纖維原單層細胞支架上形成 2D 共培養模型。 

圖：鋼圈圈定細胞接種的面積；支架支撐物放在 2D 氣-液界面（白色圓柱）里，支架在類 似肺組織在適當的條件（ECM）下培養（上皮細胞在上層和成纖維細胞浸沒）,模仿體外肺 組織環境。以防在培養過程中下撥分離或移動，支架固定在特有的支撐物上。細胞在培養 基（目標細胞所用培養基）中孵育。 

                                      建立上皮&樹突&纖維原細胞 3D 共培養 

上皮細胞&纖維原細胞共培養體系在孵箱中孵育 14 天后插入樹突細胞支架，培養基仍為混 合培養基。上皮&樹突&纖維細胞 3D 體系培養 14 天，使其形成更似生理環境的細胞間聯系。 
 
接下來你想研究肺部哪個病，哪個藥，哪種細胞就放進去相互作用吧！