人胃癌細胞 五氟尿嘧啶耐藥株

人胃癌細胞 五氟尿嘧啶耐藥株客戶收到細胞先不開蓋，放在培養箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議受收細胞時的培養基拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；

一、 細胞在培養瓶中培養至良好狀態后灌滿完全培養液并封好瓶口是細胞運輸的*辦法。從細胞資源中心獲得細胞回到自己的實驗室后，先打開外包裝，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超凈臺內，嚴格無菌操作。

二、 鏡下觀察：

未超過80%匯合度時，將瓶裝的完全培養液移入無菌瓶中，留待日后培養用，原瓶（T25瓶）保留6-8ml完全培養液，放入37℃、5%CO2孵箱培養；

超過80%匯合度時，按要求比例消化傳代。

三、消化方法

1、將瓶裝的完全培養液移入無菌瓶中，留待日后培養用。加消化液0.25% Trypsin-EDTA (1X), Phenol Red消化。

2、T25瓶加3ml PBS，洗一次，棄上清，再加1ml消化液消化，顯微鏡下觀察，等細胞完全脫離瓶壁分離成單個后，加培養基混勻，離心收集，按要求分瓶（視細胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6， 1:6-1:8），每T25瓶加培養基至6-8ml，37℃、5%CO2孵箱培養人胃癌細胞 五氟尿嘧啶耐藥株