人肝膽管癌細胞

人肝膽管癌細胞

細胞培養實驗常見問題總結：
1.一般客戶拿到細胞后，應該注意什么？客戶收到細胞后先不開蓋，放在培養箱靜置若干小時后（看細胞密度而定）在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議受收細胞后觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，顯微鏡下拍細胞100X，200X各一張），排除細胞本身污染的情況；收到細胞未開封，出現污染狀況我們負責免費發送一株細胞。
收到細胞時如無異常情況，請在顯微鏡下觀察細胞密度，如為貼壁細胞，未超過80%匯合度時，將培養瓶中培養液吸出，留下10ml培養液繼續培養；超過80%匯合度時，請按細胞培養條件傳代培養。如為懸浮細胞，吸出培養液、1000轉/分鐘離心2分鐘，吸出上清，管底細胞用新鮮培養基懸浮細胞后移回培養瓶。細胞消化液建議使用PBS配制，慎用Hanks液配制。
2.快遞細胞多久能到，是寄凍存的細胞還是復蘇好的細胞？
我們采用快遞發貨，一般外地2--3天，寄細胞前請確認當地溫度，如果氣溫低于4度的，則采用郵寄凍存細胞。
3.可否使用與原先培養條件不同之培養基？不能。每一細胞株均有其特定使用且已適應之細胞培養基，若驟然使用和原先提供之培養條件不同之培養基，細胞大都無法立即適應，造成細胞無法存活。
4.可否使用與原先培養條件不同之血清種類？不能。血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源，所以血清的種類和品質對于細胞的生長會產生極大的影響。來自不同物種的血清，在一些物質或分子的量或內容物上都有所不同，血清使用錯誤常會造成細胞無法存活。 
5.培養基中血清的比例多少合適？血清是細胞培養上一個極為重要的營養來源，所以血清的含量多少會對細胞的生長會產生極大的影響。血清的含量一般為5%-15%，不要低于5%或高過20%，因為含量過低會導致細胞營養不足，過高則會破壞滲透壓平衡。一般建議血清含量為10%，可以適量加減。
6. 何時須更換培養基？視細胞生長密度而定，或遵照細胞株基本數據上的更換時間，按時更換培養基即可。還可以參照指示劑的顏色變化進行更換。
7.RBE人肝膽管癌細胞系購買的復蘇細胞，為何會有脫落？因為運輸的過程中不可避免的會有震蕩，收到后可以離心收集。
8.購買的細胞冷凍管經解凍后，為何會發生細胞數目太少之情形？研究人員在冷凍細胞之培養時出現細胞數目太少，大都是因為離心過程操作上的失誤，造成細胞的物理性損傷，以及細胞流失。建議細胞解凍后不要立刻離心，應待細胞生長隔夜后再更換培養基即可。
人肝膽管癌細胞

9. 購買的細胞死亡或細胞存活率不佳可能原因？研究人員在細胞培養時出現存活率不佳，常見原因可歸納為：培養基使用錯誤或培養基品質不佳。血清使用錯誤或血清的品質不佳。解凍過程錯誤。冷凍細胞解凍后，加以洗滌細胞和離心。懸浮細胞誤認為死細胞。培養溫度使用錯誤。細胞置于–80°C太久。