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13710660294
品牌 | 自營品牌 | 供貨周期 | 一周 |
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應用領域 | 醫療衛生,環保,化工,生物產業,農業 |
人Burkitt's淋巴瘤細胞購買細胞注意事項:
1. 收到細胞后*先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。
2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落,將細胞置于培養箱內靜置培養過夜,隔天再取出觀察。Raji:人Burkitt`s淋巴瘤細胞此時多數細胞均會貼壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常,請將細胞離心后用新鮮培養基再次貼壁培養;如果染色結果顯示細胞無活力,請拍下照片及時和我們聯系,信息確認后我們為您再免費寄送一次。
細胞規格: 1*10(5)/ml——1*10(6)/ml
安全水平: 1
細胞種屬: 人
組織來源: B淋巴細胞;Burkitt淋巴瘤
細胞形態: 淋巴母細胞樣
細胞特性: 懸浮
細胞融合度: 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細胞檢測: 細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌
"細胞培養三不要:
養科研細胞是生物醫學研究的基本功。有三個小經驗可以和大家分享一下:
1. 不要燒瓶口。大多數人都喜歡在酒精燈的火焰上關瓶子,覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養基怎么越用越發紫的困惑?知道為什么嗎?燒瓶口燒的。培養基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系。瓶口在火焰上的時候,熾熱的空氣進入瓶內。塞緊塞子放入冰箱后,空氣變冷,壓力驟降,培養基中的碳酸就會轉化成二氧化碳,釋放出來。培養基中的碳酸少了,當然會變堿。如果不燒瓶口的話,你會發現培養液變堿的速度會大大減慢。(當然多多少少還是會有一點越用越堿,因為室溫還是比冰箱內的溫度高)
其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰。不妨試一下把手指在火上晃幾下,你會發現根本就不會燒疼。如果有細菌的話,這么晃兩下也燒不死多少。要想燒死全部細菌,除非把瓶口和塞子燒紅。我在國內從來就不燒瓶口。來美國以后發現這里更*,超凈臺內根本就不點酒精燈。
2. 不要頻繁看細胞。對于初學者而言,養細胞就像養孩子一樣,有空就要去看看。細胞越是養不好,就越是經常去看。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處,特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后,密度特別低的細胞。培養基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,形成有利于生長的局部環境。你跑去看細胞,培養瓶這么一晃,把因子都給晃散了。經??梢钥吹叫率忠惶斓酵矶荚诳醇毎?,細胞老是長不好。老手細胞一扔好幾天不管,細胞瘋長。
3. 不要怕消化。在傳代的時候,初學者往往生怕細胞消化過度,早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈,吹得滿瓶子都是氣泡。在我看來,用力吹打對細胞的損傷比消化更大。我師兄在做血管平滑肌原代的時候,37度消化過夜,細胞也沒事。我一般是等細胞完全變圓后才中止消化。細胞輕輕一晃就能下來。還有,動作要輕柔,盡量不要產生氣泡。氣泡在破裂時的機械應力相當大,對細胞的傷害也是很大的。" 詳見細胞說明書
人Burkitt's淋巴瘤細胞傳代方法: 建議1:2-1:3 兩天換液一次
凍存條件: Raji:人Burkitt`s淋巴瘤細胞詳見細胞說明書
主要文獻: 請具體查閱相關發表文章
常見培養細胞預防污染的**措施:
體外培養的細胞受到嚴重污染時,有時即使想盡各種辦法也難以挽回。因此,防止污染,預防是關鍵。只有將預防措施貫穿于整個細胞培養的始終,才能將發生污染的可能性降到*小程度。一般預防可從以下幾方面著手:
(1)添加抗生素:各種抗生素性質不同,對各種微生物的作用也不同,聯合應用比單用**好,預防性應用比污染后使用好(但迄今尚無對抗支原體**抗生素)。但反復使用抗生素會使微生物產生耐藥性,且對細胞本身也有一定影響,因此為避免誘導抗藥細菌,應定期更換培養系統中的抗生素,或盡可能不用抗生素處理。
(2)從物品、用品消毒滅菌著手:細胞培養所用物品清洗、消毒要*,各種溶液滅菌除菌要仔細,并在取樣檢菌一周后確認無菌才能使用。同時,在無菌過濾操作中,隨著濾過體積的增大,濾膜破損的可能性增加,故應選擇*后過濾的液體進行檢測。定期對二氧化碳培養箱進行消毒。具體操作:75%的酒精搽拭培養箱后,使用可移動的紫外燈*少消毒30min,加入高壓滅菌過的超純水于培養箱水槽中保持濕度。也可配制300ml的飽和硫酸銅加3L 滅菌超純水混合成硫酸銅溶液加入水槽中。
(3)從操作者做起:①進無菌室前要*洗手,按規定穿隔離衣。開始操作前要用 75%酒精棉球擦手、擦瓶口和燒灼瓶口。②操作者動作要輕,安裝吸管帽、打開或封閉瓶口等操作應在火焰近處并經過燒灼進行。但要注意,金屬器械不能在火焰中長時間燒灼,以防退火;燒過的器械要冷卻后才能使用;已吸過培養液的吸管不能再用火焰燒灼,因殘留在吸管內的培養液成分如蛋白質等燒焦后會產生有害物質,吸管再用時會將其帶到培養液中;膠塞、橡皮乳頭及塑料的細胞培養用品過火焰是也不能時間太長,以免燒焦產生有毒氣體,危害培養細胞,同時塑料細胞培養用品也會產生變形影響使用。③使用培養液前不宜過早開瓶,開瓶后的培養液應保持斜位,避免直立,以防止下落細菌的污染。不再使用的培養液應立即封閉瓶口,培養的細胞在處理之前勿過早暴露在空氣中。④操作時盡量不要談話,咳嗽以防止來自唾沫和呼出的氣流所造成的污染。⑤吸取培養液、細胞懸液時,應專管,一旦發現吸管口接觸了手和其他污染物品應棄去,以防止污染擴大或造成培養物之間的交叉污染。⑥操作完畢后應整理好工作臺面,用消毒水浸泡的紗布擦拭臺面。
(4)Raji:人Burkitt`s淋巴瘤細胞防止細胞交叉污染:所有從別處轉來的或是自己所建的細胞系都要早期留有的充足的凍存儲備,一旦懷疑發生交叉污染,可做細胞遺傳學方面的鑒定,如發現原有的細胞遺傳物發生改變,可以復蘇早期凍存的細胞使用。重要細胞系的傳代工作應由兩人*立進行。
(5)無菌室的*消毒①新潔爾滅***擦洗無菌室。使用前應稀釋即配即用。新潔爾滅和酒精相比,*大的優點是便宜,而且可以稀釋50倍用,而同樣量的酒精價格可能是新潔爾滅的幾十倍。②甲醛熏蒸法:甲醛是一種廣譜滅菌劑菌,其水溶液和氣體對各種細菌、芽孢及真菌等微生物均有殺滅作用。甲醛價廉,熏蒸消毒時不損壞衣服、家具、皮革、橡膠等。市售的甲醛水溶液中一般含37-40%的甲醛。C0499 HFTF細胞株 ,公司提供背景資料、生物體、生長特性、來源、器官、類型、形態、培養條件、應用、系、疾病、組織、凍存條件等復蘇及凍存說明書信息,我們擁有豐富的細胞系培養經驗,能提供細胞培養全fang位的技術支持,讓您實驗再無煩擾!
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